StarLighter SYBR Green qPCR Mix
(Universal)
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
FS-Q1001 | StarLighter SYBR Green qPCR Mix (Universal) | 100rxn×20μl (1ml) | 400 |
FS-Q1002 | StarLighter SYBR Green qPCR Mix (Universal) | 125rxn×20μl×4 (1.25ml×4) | 1800 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)述：
StarLighter SYBR Green qPCR Mix是一款含基因工程酶的qPCR試劑。該基因工程酶可耐受高濃度的SYBR Green I染料，反應(yīng)體系中加入足夠多的SYBR Green I 染料，能夠降低熒光信號(hào)達(dá)到閾值的循環(huán)數(shù)（Ct值），提高信噪比、線性和靈敏度。StarLighter SYBR Green qPCR Mix擴(kuò)增特異性強(qiáng)，能有效減少非特異性擴(kuò)增，數(shù)據(jù)結(jié)果更加可靠。產(chǎn)品能有效擴(kuò)增復(fù)雜模板，能有效應(yīng)對(duì)高GC或高AT的目的片段。同時(shí)抗抑制劑干擾能力強(qiáng)。
主要應(yīng)用：
基因表達(dá)分析；
低拷貝數(shù)基因檢測(cè)；
基因敲除驗(yàn)證；
基因表達(dá)驗(yàn)證；
RNA拷貝數(shù)檢測(cè)（病毒及病菌等檢測(cè)）。
技術(shù)特點(diǎn)：
擴(kuò)增特異性強(qiáng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可靠；
反應(yīng)效率高，Ct值提前；
信噪比高，靈敏度高；
高GC或高AT的片段擴(kuò)增效果好；
耐受抑制劑能力強(qiáng)。
優(yōu)異表現(xiàn)：
(1)擴(kuò)增特異性強(qiáng)，數(shù)據(jù)結(jié)果可靠
Fig1：
不同試劑的 qPCR 結(jié)果準(zhǔn)確性比較。以人的 cDNA為模板，使用同廠家試劑，擴(kuò)增長(zhǎng)度為 219 bp 的片段，GC%=64% (TR基因)。分別得到 StarLighter SYBR Green qPCR Mix與各品牌的擴(kuò)增和熔解曲線圖；SL—StarLighter SYBR Green qPCR Mix，使用此試劑得到非常完美的擴(kuò)增 曲線，熒光信號(hào)強(qiáng)，溶解曲線及電泳條帶單一 、準(zhǔn)確。
注：SL-StarLighterSYBR Green qPCR Mix，使用此試劑得到非常完美的擴(kuò)增曲線，熒光信號(hào)強(qiáng)，熔解曲線及電泳條帶單一、準(zhǔn)確。
2、擴(kuò)增效率高，線性范圍好， 低拷貝檢測(cè)靈敏度高
3、 熒光信號(hào)強(qiáng)，靈敏度高
4、Ct 值出現(xiàn)更早
5、高GC或高AT的片段擴(kuò)增效果好
6、耐受抑制劑能力強(qiáng)
7、 試劑穩(wěn)定易保存
競(jìng)品 | ApoE（人，DNA，amplicon length=322bp, GC%=75%） | TR（人，DNA，amplicon length=219bp, GC%=64.0%） | UBC（人，cDNA，amplicon length=123bp, GC%=52.0%） | |||
特異產(chǎn)物 | 擴(kuò)增效率 | 特異產(chǎn)物 | 擴(kuò)增效率 | 特異產(chǎn)物 | 擴(kuò)增效率 | |
TG | √ | 149.631% | √ | 96.795% | ||
TK | √ | 102.101% | ||||
VZ | √ | 97.196% | ||||
AB | √ | 98.789% | ||||
TY3 | √ | 98.028% | √ | 110.361% | ||
KA | √ | 108.63% | ||||
SL | √ | 105.049% | √ | 95.998% | √ | 100.374% |
YS | √ | 99.905% | ||||
CW | ||||||
BR | √ | 95.611% | ||||
RC | √ | 92.762% | √ | 97.752% | ||
TY1 | √ | 96.83% | ||||
定量反應(yīng)（體系、程序參數(shù)）
（1）推薦反應(yīng)體系
組分 | 10 μl /rxn | 20 μl /rxn | 終濃度 |
H2O（PCR級(jí)） | 補(bǔ)至10μl | 補(bǔ)至20μl | N/A |
2× SYBR qPCR Ready Mix | 5μl | 10μl | 1x |
10 μM 正向引物 | 0.3 μl | 0.6 μl | 300 nM |
10 μM 反向引物 | 0.3 μl | 0.6 μl | 300 nM |
cDNA模板 | （<50ng/μl） | （<50ng/μl） | 根據(jù)需要 |
RoX | 0.2μl | 0.4μl | 50/500nM（根據(jù)儀器需要） |
（2）推薦反應(yīng)程序
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán) |
酶激活 | 95℃ | 5 min | |
變性 | 95℃ | 30 sec | 40 cycles |
退火/延伸 數(shù)據(jù)采集 | 60℃ | ≥20 sec（根據(jù)儀器和擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度；若采用三步法，20sec退火后，72℃延伸1sec） | |
熔解曲線 | 根據(jù)儀器要求 | ||
